iPSC培養(yǎng)基在干細(xì)胞研究和相關(guān)領(lǐng)域有廣泛應(yīng)用,以下是一些具體案例:
iPSC的維持和擴(kuò)增:Gibco™Essential8™培養(yǎng)基是一種無滋養(yǎng)層、無外源成分的培養(yǎng)基,只包含多能性干細(xì)胞生長和擴(kuò)增所必需的八種基本組分。有證據(jù)表明,利用該培養(yǎng)基可維持多種誘導(dǎo)多能性干細(xì)胞系的多能性,支持50代以上的iPSC培養(yǎng),且細(xì)胞無任何核型異常征象,并可維持iPSC向所有三個胚系譜系分化的能力。
擬胚體形成和分化:Gibco™Essential6™培養(yǎng)基與Essential8培養(yǎng)基結(jié)合使用時,可支持穩(wěn)定的擬胚體形成。它不包含F(xiàn)GF2,因為FGF2會抑制擬胚體形成和分化,同時它提供了一種靈活的形式,可以根據(jù)特定應(yīng)用調(diào)整轉(zhuǎn)化生長因子β(TGFβ)和堿性成纖維細(xì)胞生長因子(FGF2)的水平,以實現(xiàn)更高效的擬胚體分化。
應(yīng)對高壓力事件:在進(jìn)行單細(xì)胞傳代等高壓力操作時,可使用Essential8培養(yǎng)基與RevitaCell添加劑組合。RevitaCell添加劑通過更特異性的ROCK抑制劑,能在高難度應(yīng)用中支持細(xì)胞,使應(yīng)激影響最小化,并且與其他ROCK抑制劑不同,它對下游細(xì)胞應(yīng)用沒有致癮性。
從滋養(yǎng)層到無滋養(yǎng)層培養(yǎng)的過渡:Essential8適應(yīng)試劑盒可幫助細(xì)胞從滋養(yǎng)層依賴培養(yǎng)體系適應(yīng)轉(zhuǎn)換至無滋養(yǎng)層培養(yǎng)體系,同時維持最大的細(xì)胞活力,能在最大限度減少分化的情況下擴(kuò)增細(xì)胞,還可以以單細(xì)胞形式傳代干細(xì)胞系,且對遺傳穩(wěn)定性沒有影響。
實現(xiàn)周末免飼養(yǎng)培養(yǎng):使用包含Qkine熱穩(wěn)定FGF2-G3和TGF-β1PLUS生長因子的E8樣培養(yǎng)基,可在不需要每日更換培養(yǎng)基的情況下對iPSCs進(jìn)行維持、擴(kuò)增和多能性評估,實現(xiàn)了無需周末維護(hù)的培養(yǎng)和擴(kuò)增,同時保持了細(xì)胞的多能性和增殖潛力。在該培養(yǎng)基中培養(yǎng)了一個月的iPSC,始終表現(xiàn)出高密度而沒有自發(fā)分化,且通過高水平表達(dá)多能性標(biāo)志物NANOG、SOX2和OCT-4,保持了它們的多能潛力。