高靈敏度的脂滴活細胞成像熒光染料

LipiDye<Lipid Droplet Green>

LipiDye是一種可以對脂滴進行高靈敏染色的新型熒光素。與以往的脂滴檢測色素Nile Red相比顯示出高S/N比?；罴毎凸潭毎墒褂?。

※本產(chǎn)品用于研究，不可用于臨床。

※本產(chǎn)品由名古屋大學(xué)轉(zhuǎn)化生命分子研究所（ITbM）的研究成果商品化而來

Yamaguchi E., et al., Angew. Chem. Int. Ed., 54:4539～4543 (2015).

◆脂滴（Lipid droplet）的含義

脂滴（Lipid droplet）是在脂肪細胞（Adipocyte）中發(fā)現(xiàn)的巨大的中性脂質(zhì)的結(jié)塊，主要成分是甘油三酯（Triglyceride）和甾醇酯（Sterol Ester）的單分子層結(jié)構(gòu)體。脂滴被認為是儲存細胞內(nèi)中性脂質(zhì)的細胞器，并且有較多肥胖和疾病相關(guān)的報道。最近，除了脂肪細胞，還在肝細胞、平滑肌細胞、神經(jīng)膠質(zhì)細胞等各種細胞中發(fā)現(xiàn)了脂滴。這些發(fā)現(xiàn)明確了其不僅僅是作為中性脂質(zhì)的儲存場所，還有抑制代謝和基因表達調(diào)節(jié)等各種功能。非脂肪細胞的脂滴在1μm以下，與脂肪細胞中的10~100μm的脂滴相比較小。目漸多評論認為，脂滴是每個細胞中都存在的普遍的小型細胞器。實際上，近年來與脂滴研究相關(guān)的研究報告數(shù)量顯著增加（據(jù)Pubmed的調(diào)查）。

◆脂類自噬（Lipophagy）：脂滴的自噬

自2009年Nature初次報道自噬是脂滴分解的過程之后*，脂類自噬（Lipophagy）作為自噬抑制的脂質(zhì)代謝引起人們的關(guān)注。脂類自噬的形成以及活性化機制作為基于脂滴分解的脂質(zhì)代謝的新過程，期待它可以有效地預(yù)防脂質(zhì)異常的疾病。

＊Singh, et al., Nature., 458: 1131-1135． （2009）．

◆特點

●　LipiDye是依存溶劑的分子極性發(fā)光的熒光素，選擇性地吸收脂滴，使其在中性脂質(zhì)中發(fā)出綠色的熒光。

●　由于其在水溶液中沒有熒光，所以細胞質(zhì)中的非特異性發(fā)光被明顯抑制，與以往的色素相比具有高S/N比。

●　也可用于脂滴的實時成像和固定細胞中的觀察。

●　具有很高的光穩(wěn)定性，是實時成像的理想選擇。

●　低濃度的使用量（1 μM）就可獲得足夠地靈敏度，工作濃度（1 μM）幾乎不顯示細胞毒性。

◆化合物信息

●　IUPAC name: 1,3-Diphenyl-2-[4-(N,N-diphenylamino)phenyl]benzo[b]phosphole-P-oxide

●　化學(xué)式 : C₃₈H₂₈NOP

●　分子量 : 545.58 g/mol

●　溶解度 : 可溶于DMSO

◆波長

Excitation/ Emission: 405 nm / 521～530 nm

※LipiDye用一般的綠色熒光色素使用的濾鏡（FITC和GFP等）無法檢測。請使用合適的濾鏡。

◆使用案例

與Nile Red比較

脂肪細胞的脂滴用LipiDye或者Nile Red染色，檢測箭頭（左圖）指示范圍的熒光強度（右圖）。無論是靈敏度還是S/N比LipiDye都比Nile Red高。脂滴中的熒光強度LipiDye較強（distance 0～10 μm），細胞質(zhì)中的非特異性熒光信號Nile Red較強（distance 10～20 μm）。

脂肪前驅(qū)細胞3T3-L1細胞的分化

用LipiDye觀察脂肪前驅(qū)細胞3T3-L1的分化過程?？梢钥闯觯只^程中脂滴不斷變大。

比較固定細胞

比較培養(yǎng)脂肪細胞用多聚甲醛固定后染色的情況（左圖）和活細胞染色后用多聚甲醛固定的情況（右圖），無論哪一種情況都可以高靈敏度地檢測出脂滴。

※甲醇固定可能會影響到脂滴的構(gòu)造，不建議使用。請使用多聚甲醛等的交聯(lián)型固定試劑。

驗證光穩(wěn)定性

評價了LipiDye和BODIPY493/503、Fluorescein、Prodan隨著照射時間的光穩(wěn)定性。LipiDye與其他的熒光素相比顯示出了較高的光穩(wěn)定性。

驗證細胞毒性

用MTT法評價LipiDye的細胞毒性。LipiDye幾乎不影響細胞存活率。

◆相關(guān)產(chǎn)品

※ 本頁面產(chǎn)品僅供研究用，研究以外不可使用。