即用型

腦組織凍存液

本品是冷凍保存大鼠或小鼠胚胎腦組織用的凍存液。

只要將腦組織放入解凍后的本品中即可實(shí)現(xiàn)凍存。

凍存的腦組織在解凍后可通過神經(jīng)細(xì)胞分散溶液（產(chǎn)品編號(hào)：291-78001，297-78101）和神經(jīng)細(xì)胞培養(yǎng)基（產(chǎn)品編號(hào)：148-09671）進(jìn)行分散和培養(yǎng)。

◆特點(diǎn)

●　能凍存解剖后的大鼠或小鼠的腦組織。

●　隨時(shí)可用

◆凍存數(shù)據(jù)：大鼠海馬體（胎生19日）

與其他公司的產(chǎn)品相比，在使用本品保存的腦組織中，能獲得多3倍以上的活細(xì)胞。

注意事項(xiàng)

請(qǐng)盡量縮短從開始解剖到一次冷凍開始的時(shí)間。（請(qǐng)以從進(jìn)行動(dòng)物麻醉到將腦組織放入冷凍保存溶液中的時(shí)間控制在1小時(shí)之內(nèi)為標(biāo)準(zhǔn)。）從胚胎中取出的細(xì)胞存活率隨時(shí)間的推移而下降。使用神經(jīng)細(xì)胞分散液能去除死亡細(xì)胞，減少得到的細(xì)胞總數(shù)。冰上操作。

◆實(shí)驗(yàn)方案例子

解剖

1.　麻醉小鼠或大鼠。

2.　用70%乙醇對(duì)麻醉動(dòng)物進(jìn)行全身（包括胡須和尾巴）消毒。

3.　用不銹鋼盤將動(dòng)物送入鋪好無塵紙的清潔區(qū)。

4.　從妊娠動(dòng)物中取出胚胎，放入含有L-15溶液的培養(yǎng)皿中。預(yù)先將培養(yǎng)皿與L-15溶液的溫度調(diào)節(jié)到4℃。將盛放胚胎的培養(yǎng)皿至于冰塊上。

4.　※L-15溶液：含有終濃度為0.05 mg/mL硫酸慶da霉素的Leibovitz's L-15培養(yǎng)基

5.　將胚胎轉(zhuǎn)移到培養(yǎng)皿的蓋子上，并使用顯微鏡快速移除腦組織。

6.　解剖后的腦組織放入另一個(gè)裝有L-15溶液的培養(yǎng)皿，再將培養(yǎng)皿放置到冰塊上。

一次冷凍

1.　將從冰箱中取出本品和冷凍用碎冰盒放到清潔區(qū)附近。

2.　用鑷子把冷凍的腦組織放入本品中，蓋好試管蓋（放入腦組織前要充分混合保存溶液）。

3.　將試管埋入冷凍用碎冰盒中，試管與冰塊要緊密接觸（試管要埋入試管蓋剛好露出冰面的位置）。

4.　蓋上泡沫箱，靜置90分鐘。

二次冷凍

1.　一次冷凍后，將裝有組織的試管轉(zhuǎn)移至防凍套管，然后立刻放入超低溫冰箱（-80℃）。（防凍套管要直接放置到冰箱內(nèi)的底面。）

1.　※為了將裝有組織的試管的溫度變化控制在最小范圍，操作時(shí)動(dòng)作要快速。

1.　※進(jìn)行這一步操作時(shí)，需注意樣品管蓋切勿與保存溶液相接觸。

2.　在超低溫冰箱（-80℃）中靜置3小時(shí)。（靜置時(shí)間可延長(zhǎng)30分鐘左右。但不能少于3小時(shí)。）

2.　※期間避免反復(fù)開關(guān)冰箱門。

保存

1.　二次冷凍后，將裝有組織的樣品管置于凍存架上，然后立刻放入液氮罐中。

1.　※進(jìn)行這一步操作時(shí)，需注意樣品管蓋切勿與管內(nèi)的保存溶液相接觸。